Halymenia pseudofloresia, Halymeniales, polissacarídeos sulfatados, métodos de obtenção.
Abstract
Os polissacarídeos sulfatados (PS) são macromoléculas complexas e heterogêneas de grande interesse em Biotecnologia. A rodofícea Halymenia pseudofloresia tem sido relatada como possuidora de PS com atividades biológicas. Porém, o emprego de diferentes técnicas pode influenciar o rendimento e/ou propriedades químicas desses compostos. Desta forma a busca por novas estratégias de obtenção desses polímeros sugerem estudos. Avaliou-se a eficiência de duas metodologias de precipitação (M I e M II) dos PS isolados da alga marinha vermelha H. pseudofloresia, comparando o rendimento, o fracionamento e o grau de purificação. O PS total (PST) foi obtido com papaína bruta em tampão acetato de sódio 0,1 M (pH 5,0) contendo cisteína 5 mM e EDTA 5 mM. O PST assim obtido foi precipitado com uma solução de cloreto cetilpiridínio (CCP) a 10% (M I) ou, alternativamente, com etanol absoluto (M II). O PST foi analisado por cromatografia de troca iônica em coluna de DEAE-celulose utilizando um gradiente de NaCl, sendo as frações de PS obtidas submetidas a procedimento de eletroforese em gel de agarose a 0,5%. Verificou-se que tanto os rendimentos como os perfis cromatográficos de PST foram diferentes entre os métodos. O M II foi mais eficiente na obtenção de PST (46,08%) quanto comparado ao M I (41,16%). A separação de seis diferentes frações de PS (F I; F II; F III; F IV e F V), eluídas com 0,50; 0,75; 1,00; 1,25; 1,50 e 1,75 M de sal, respectivamente, também foram obtidas com o emprego do M II quando comparadas ao M I, porém revelando, por eletroforese, moléculas com baixo grau de purificação em ambos os métodos. Por outro lado, os resultados sugerem que a utilização de apenas etanol seria uma forma mais econômica para a obtenção de PS da rodofícea H. pseudofloresia.